가용성 타키키닌 길항제, 그 제조 방법 및 용도

(19) 대한민국특허청(KR)
(12) 공개특허공보(A)
(51)Int. Cl.6
C07K 7/80
(11) 공개번호 특1999-0087385
(43) 공개일자 1999년12월27일
(21) 출원번호 10-1998-0706800
(22) 출원일자 1998년08월28일
번역문제출일자 1998년08월28일
(86) 국제출원번호 PCT/EP1997/00917 (87) 국제공개번호 WO 1997/31941
(86) 국제출원출원일자 1997년02월26일 (87) 국제공개일자 1997년09월04일
(81) 지정국 AP ARIPO특허 : 가나 케냐 레소토 말라위 수단 스와질랜드
EA 유라시아특허 : 아르메니아 아제르바이잔 벨라루스
EP 유럽특허 : 오스트리아 벨기에 스위스 리히텐슈타인 독일 덴마크
스페인 프랑스 영국 그리스 이탈리아 룩셈부르크 모나코 네덜란드
포르투칼 오스트리아 스위스 리히텐슈타인 독일 덴마크 스페인 핀랜
드 영국
국내특허 : 아일랜드 알바니아 오스트레일리아 보스니아-헤르체고비나
바베이도스 불가리아 브라질 캐나다 중국 쿠바 체크 에스토니아 그
루지야 헝가리 이스라엘 아이슬란드
(30) 우선권주장 MI96A000401 1996년03월01일 이탈리아(IT)
(71) 출원인 센트로 인터유니버시타리오 디 리체르카 쉬 펩티디바이오악티비-유니버시타
데글리 스튜디디 나폴리 페데리코II 페돈 카를로
이탈리아 아이-80138 나폴리 코르소 움베르토 아이 74
(72) 발명자 파보네 빈센초
이탈리아 아이-80138 나폴리 비아 메초칸노네 4
롬바르디 안젤리나
이탈리아 아이-80138 나폴리 비아 메초칸노네 4
페돈 카를로
이탈리아 아이-80138 나폴리 비아 메초칸노네 4
데 로사 마리오
이탈리아 아이-80138 나폴리 비아 메초칸노네 4
로씨 모세
이탈리아 아이-80138 나폴리 비아 메초칸노네 4
(74) 대리인 권석흠, 이영필, 이상용
심사청구 : 없음
(54) 가용성 타키키닌 길항제, 그 제조 방법 및 용도
요약
본 발명에서는, 높은 용해도와 강한 타키키닌-길항 활성을 가진 하기 [화학식 1]의 구조를 갖는 화합물이
제공된다.
[화학식 1]
시클로[X1
1-Z1
2-X2
3-X3
4-Z2
5-X4
6]시클로(2β-5β)
여기서, X1은 (D 또는 L)Cys(Y) 또는 (D 또는 L)SeCsy(Y)이고, Z1은 Asp Z2는 Dap, 또는 Z1은 Dap Z2은 Asp
이고, X2, X3 및 X4는 Z1, Z2, X2, X3 및 X4가 동일한 D 또는 L 입체구조를 갖는 천연 또는 합성 소수성 아
미노산이며, Y는 알파 또는 베타 티오아세탈 결합에의해 시스테인에 결합되어 있는 푸라노오스 또는 피라
노오스 형태의 알도 및 케토 헥소오스, 또는 티오에테르 결합에 의해 시스테인에 결합되어 있고 5 내지
10개의 모노머 단위체로 이루어진 시클리톨 또는 폴리비닐 알콜 또는 PEG 임.
명세서
기술분야
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본 발명은 가용성 타키키닌 길항제, 그 제조 방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
배경기술
다수의 타키키닌 길항제가 문헌에 의해 공지되어 있는데 이 길항제중 단고리형(monocyclic)(A.T.
McKnight 등, Br. J. Pharmacol. 1991, 41,376) 또는 이중고리형(bicyclic)(V. Pavone 등, J. Chem. Soc.
Perkin Trans 2, 1995, 987) 화합물이 특히 흥미를 끈다. 지금까지 개발된 화합물은 모두, 소수성이 높아
서 물에 난용성이라는 특징을 갖는다. 실제로 WO 93/21227호에는 난용성의 바이사이클 펩티드 타키키닌
길항제가 개시되어 있는데, 상기 특허에서 청구한 길항제는 모두 소수성 측쇄를 가진 아미노산 구조로 되
어있는 것을 특징으로 하며, 측쇄가 극성인 경우에는 그 극성기에 소수성을 부여하는 작용기가 도입되어
있는 것을 특징으로 한다. 이러한 극소수성 화합물들은, 시험관내 실험에 있어서는 주목할만한 생물학적
활성을 가짐에도 불구하고 난용성(물 1㎖에 15㎍이하로 용해됨)이라는 불가피한 특성 때문에, 지금까지
이러한 분자들을 약리학적으로 이용하는데 있어서는 상당한 장애가 있었다. 이러한 종류의 분자들은 친수
성을 증가시키면 그 생물학적 활성이 점진적으로 감소한다는 것도 마찬가지로 문헌에 의해 공지된 사실이
다(L. Quartara 등, J. Med. Chem. 1994, 37, 3630). 참고 문헌에 기재된 이러한 문제점 때문에, 약업계
의 관심은 높은 특이성을 가지면서도 수용성을 가진 새로운 타키키닌-길항제를 찾는데에 모아졌다.
발명의 상세한 설명
본 발명에서는, 높은 수용성과 동시에 높은 생물학적 활성을 보이는 타키키닌-길항제를 발견하였다. 본
발명의 화합물은 하기의 [화학식 1]을 갖는다.
화학식 1
시클로[X1
1-Z1
2-X2
3-X3
4-Z2
5-X4
6]시클로(2β-5β)
여기서, X1은 (D 또는 L)Cys(Y) 또는 (D 또는 L)SeCys(Y)이고, Z1은 Asp 이고 Z2는 Dap 이거나 또는 Z1은
Dap 이고 Z2은 Asp 이고, X2, X3 및 X4는 천연 또는 합성 소수성 아미노산이며, 상기 Z1, Z2, X2, X3 및 X4
가 동일한 D 또는 L 입체구조를 갖고, Y는 알파 또는 베타 티오- 또는 셀레노-아세탈 결합에 의해 시스테
인 또는 셀레노시스테인에 결합되어 있는 퓨라노오스 또는 피라노오스 형태의 알도 및 케토 헥소오스로부
터 선택되거나, 또는 티오- 또는 셀레노-에테르 결합에 의해 시스테인또는 셀레노시스테인에 결합되어 있
고 5 내지 10개의 모노머 단위체로 이루어진 시클리톨 또는 폴리비닐 알콜 또는 PEG로부터 선택된 글리코
시드 그룹이다.
상기 화합물 중에서도 X2가 Trp 또는 1-Nal이고; X3가 Phe이며, X4가 Leu 또는 Cha인 화합물이 특히 바람
직하다.
[화학식 1]의 화합물은 다수의 부재탄소를 가지므로 생각할 수 있는 모든 에난티오머들도 본 발명에 포함
된다.
[화학식 1]의 화합물들은 독특한 구조상의 특성을 보이는데 이러한 특성에 의해 공지 화합물들과 구별된
다. 실제로, 본 발명에서 청구되는 화합물은 지금까지 보고된 화합물들(A.T. McKnight 등, Br. J.
Pharmacol. 1991, 41, 376; C.A. Maggi 등, J. Pharmacol. 및 Expt. Therapeutics, 1994, 271, 1489)과는
달리 친수성이 매우 높은 작용기를 가지고 있는데, 이 작용기에 의해 수용성이 100배 이상 높아진다. 이
러한 신종 분자는, 이전에 개발된 난용성 화합물에 비하여 더 강한 약리 활성과 높은 수용성을 갖기 때문
에, 다양한 약제로 개발하기에 이상적이다. 이러한 이용 측면에 관한 한, 이전에 연구된 유도체들이 약제
학적 조성물로 개발될 수가 없어 치료에 이용될 수 없었다는 점에서, 본 발명의 화합물은 이전에 연구된
난용성 유도체들과는 실질적으로 차이가 난다.
보다 상세하게는, [화학식 1]의 화합물들은 시스테인 또는 셀레노시스테인 잔기를 특징으로 하고, 상기
잔기의 -SH 또는 SeH 그룹은 갈락토오스, 글루코오스, 이노시톨, PEG 잔기 또는 저분자량의 폴리알콜과의
티오- 또는 셀레노-글리코시드 또는 티오- 또는 셀레노-에테르 결합에 관여하는데, 난용성의 길항제 중에
서 가장 우수한, 예컨대 용해도가 단지 15㎍/㎖인 MEN 10627 화합물(C.A. Maggi 등, J. Pharmacol. and
Expt. Therapeutics, 1994, 271, 1489)과 같은 길항제의 활성에 비하여, 약간이라도 더 높은 활성을 갖는
다. 현재까지 문헌에서 찾아볼 수 있는 데이터에 의하면 이러한 화합물들은 수용성이 증가하면 필연적으
로 약리활성이 감소(L. Quartara 등, J. Med. Chem. 1994, 37, 3630)하는 것을 감안하면 이는 더욱 더 놀
라운 것이다.
베타-D-갈락토오스와 작용하는 시스테인이 하기 잔기로 치환된 유사체와 관련해서, [화학식 1]의 화합물
은 놀랍게도 상반되는 거동 양식을 보인다;
Asn(β-D-gal): Gln(β-D-gal); Ser(β-D-gal); hSer(β-D-gal); hCys(β-D-gal).
보다 상세하게는, 비교를 위해 Asn(β-D-gal)과 Ser(β-D-gal)을 갖는 유사체를 합성하고 그 용해도와 생
물학적 활성을 실시예 2에 기재하였다.
문헌에서 공지된 여러 가지 방법에 따라 본 발명의 목적 대상물인 [화학식 1]의 화합물을합성할 수 있다
(예컨대 Schroeder 등, "The Peptides" 제 1권, 아카데미 출판사, 1965; Bodanszky 등, "Peptide
Synthesis", 인터사이언스 출판사, 1966; Barany ＆ Merrifield, "The peptides; Analysis, Synthesis,
Biology", 2, 제 1장, 아카데미 출판사, 1980). 상기 합성 방법으로는 펩티드-고상 합성법, 용액중 펩티
드 합성법, 유기 화학 합성법, 또는 상기 기술들의 복합적인 방법 등이 있다. 합성 방법은 특정 분자 조
성에 따라 선택될 것이 분명하다. 본 발명에서 청구되는 분자는 모두 펩티드이므로, 고상 합성 기술과
고전적인 합성기술인 용액중 합성법을 적절히 조합한 방법이 바람직하다. 이러한 합성법은 특히 산업적
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규모에 있어서 생산원가가 저렴하다. 상세히 설명하면 상기 방법은 다음과 같다:
ⅰ) N-말단이 보호기로 보호되고 적절하게 활성화된 아미노산을, 아미노산 또는 C-말단이 보호기로 보호
된 펩티드 사슬과 연속적으로 커플링 반응시켜 용액중에서 펩티드 사슬 단편을 합성하고, 합성 중간체를
분리한 다음 상기 단편의 N 또는 C 말단의 보호기를 선택적으로 제거한 후, 목적하는 펩티드가 만들어질
때까지 커플링 반응을 시킨다. 마지막으로, 예컨대 N 말단 및 C 말단 또는 측쇄와 같이 고리화반응에 관
여하는 그룹의 보호기를 선택적으로 제거한 후 농축시킨다. 필요한 경우 최종적으로 측쇄의 보호기를 제
거한다.
ⅱ) 고상중에서 미리 보호기를 제거한 측쇄들간에 고리화반응을 시킴으로써, 불용성 폴리머 지지체상에서
C-말단에서부터 N-말단까지 펩티드 사슬을 합성하는 고상 합성방법이 있다. 적당한 스캐빈저 존재하에서
무수 불소산 또는 트리플루오로아세트산으로 가수분해시킴으로써 수지 지지체로부터 펩티드를 제거한 후,
묽은 용액에서 단고리형 펩티드를 고리화시킨다. 이어서 측쇄의 보호기를 제거한다.
Fmoc-cys(β-D-Gal(Ac)4)-OH, Fmoc-Ser(β-D-Gal(Ac)4)-OH, Fmoc-Asn(β-D-Gal)-OH는, 문헌에 공지된 방
법에 따라 얻을 수 있다(M. Gerz, 등, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1993, 32, 269; Kessler, H. 등, J.
Am. Chem. Soc. 1992, 114, 4805; Kessler H. 등, J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 7550).
셀레노-유도체는, 아미노 작용기를 보호하는 방법에 관한 공지 기술을 이용함으로써 셀레노시스테인을 출
발물질로 하여 얻을 수 있다.
앞서 밝힌 [화학식 1]의 화합물은 다른 유사한 길항제에 비해 효능이 더 높은 길항제이므로, 공지 제품에
서 요구되는 양보다도 더 적은 양을 투여할 수 있다.
따라서, 이러한 화합물은 인간과 고등 동물을 치료할 목적으로 투여하기 적합하다. 실제로 이 화합물들은
수용성이기 때문에 비경구, 경구, 흡입 및 설하 투여에 적합한, 간단하고도 저렴한 약제를 만들 수 있는
한편, 높은 생리 활성 때문에 소량만으로도 효과적인 약효를 얻을 수 있다.
적절한 제형의 예로는, 캅셀제, 정제, 시럽제, 용액제, 또는 멸균 주사용 동결건조제, 에어로졸제 등이
있다.
본 발명의 화합물은 관절염, 천식, 염증, 종양세포 성장, 위장관 운동항진증, 헌팅톤 질환, 신경염, 신경
통, 편두통, 고혈압, 요실금, 두드러기, 카르시노이드 증후군의 증상들, 인플루엔자 및 감기를 치료하기
위해 0.01mg/kg 내지 10mg/kg의 범위에서 투여될 수 있다.
본 발명에 사용된 아미노산의 약자 목록
아미노산의 명명 및 그 약자는 생화학 명명법에 관한 IUPAC-IUB 공동위원회(IUPA-IUB Joint Commission
on Biochemical nomenclature)의 권고 사항에 따른것이다(Eur. J. Biochem. 1984, 138:9); 상기 아미노산
은 특별한 언급이 없는한 L-입체 구조를 의미한다. 그 외의 약자는 다음과 같다:
NKA = 뉴로키닌 A; SP = Substance P; Dap =2,3-디아미노프로피온산; SeCys = 셀레노시스테인; PEG = 폴
리에틸렌 글리콜; 1-Nal = 1-나프틸-알라닌; Cha = 시클로헥실알라닌; gal = 갈락토오스; hSer = 호모세
린; hCys = 호모시스테인; Boc = 터-부틸옥시카르보닐; PAM = 페닐아세트아미도메틸; Fmoc = 9-플루오레
닐메틸옥시카르보닐; PyBop = 벤조트리아졸-1-일-옥시피롤리딘포스포늄 헥사플루오로포스페이트; DIEA =
디이소프로필에틸아민; Fm = 플루오레닐 메틸; DCC =디시클로헥실카르보디이미드; DMF = N-N' 디메틸포름
아미드; DCM = 디클로로메탄; i-PrOH = 이소프로판올; Ac = 아세틸; DMS = 디메틸설퍼 ; MeOH = 메탄올;
Rt = 머무름 시간; FAB-MS = 고속원자충격질량분석기 ; HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피; HOBt = 1-하
이드록시벤조트리아졸; TFA = 트리플루오로아세트산.
하기 실시예는 본 발명을 보다 예시하기 위한 것으로, 본 발명이 하기 실시예로만 국한되는 것은 아니다.
실시예
실시예 1
A) X1이 Cys(β-D-Gal) 이고, Z1이 Asp 이고 X2가 Trp 이고, X3가 Phe 이고, Z2가 Dap 이고, X4가 Leu{시클
로[Cys1(β-D-Gal)-Asp2-Trp3-Phe4-Dap5-Leu6]시클로(2β-5β)}인 [화학식 1]의 화합물의 제조.
Applied Biosystem의 ABI 430A 합성기기를 이용하여, Boc-Leu 관능기가 있는 PAM 수지상에서, Boc의 화학
적 성질을 이용하여 고상으로 펩티드를 조립하였다. 표준적인 보호기 제거 반응 및 커플링 반응 사이클을
이용하였다. 하기 아미노산을 그 순서대로 Boc-Leu-PAM 수지(0.5 mmol) 0.651g과 커플링 하였다: Boc-
Dap(Fmoc)-OH (1.5 mmol; PyBop 1.5 mmol, DIEA 3 mmol); Boc-Phe-OH, Boc-Trp(CHO)-OH 및 Boc-Asp(OFm)-
OH (2 mmol과 커플링제로서 DCC/HOBt). Asp의 β-카르보닐과 Dap의 β-아미노기 사이의 고리화 반응을 수
행하기 전에, DMF에 피페리딘이 20% 혼합된 용액을 3분간 및 7분간 처리하는 2회의 보호기 제거반응을 실
시하여 두 개의 아미노산 측쇄의 보호기를 제거하였다. 이어서 다음의 용매로 세척 과정을 반복하였다:
DCM, DMF, DCM, 및 i-PrOH.
15㎖의 DMF에 현탁되어 있는 수지에 PyBop (1.5 mmol)과 DIEA(3 mmol)를 부가하여 고리화 반응을 진행하
였다. 상기 용액을 밤새도록 반응 시켰다. 그런 다음, DMF와 DCM을 이용하여 세척하였다. Asp 아미노기의
보호기를 제거한 후, PyBop (0.78g, 1.5 mmol)를 커플링제로 사용하고 DIEA (3 mmol)를 염기로 사용하여
Fmoc-Cys(β-D-Gal(Ac)4)-OH (1.5 mmol)를 모노사이클릭 펩티드에 커플링시켰다. 밤새도록 반응시켰다.
Dap와 Asp의 측쇄 반응에 대해 기재한 바에 따라, Cys-Fmoc 그룹의 보호기를 제거하였다. 탐과 메리필드
의 고/저 HF 방법(HF/DMS/p-티오크레졸/p-크레졸 2.5/6.5/0.5/0.5; 0℃에서 4시간, 그 다음에 HF/p-크레
졸 9/1; 0℃에서 30분)에 따라, 수지로부터 모노사이클릭 펩티드를 분리하였다. 분석용 HPLC에 따라
362mg의 비정제 생성물을 회수(67%)한 후, 분리용(preparative) HPLC로 정제(Rt= 17.7분; 순도 >99%)하여
순수 생성물을 100mg(20%의 수율) 수득하였다.
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93㎖의 DMF(1 mM)에 용해시킨 100mg의 펩티드(3) (0.0926 mmol)에, 48mg의 PyBop(1 eq)와 pH 8 내지 8.5
인 46㎕의 DIEA(3 eq)를 부가하였다. 상기 용액을 밤새 반응시키고 분석용 HPLC에 의해 반응 종결 여부를
결정하였다. DMF를 제거한 후, 상기 시료를 클로로포름에 용해시키고 탄산수소나트륨 포화 용액으로 2 차
례 그리고 물로 2차례 추출하였다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 진공하에서 용매를 제거하였다.
이렇게하여 얻은 비정제 물질을 아세토니트릴/물 용매에 재용해시킨 다음 동결 건조시켰다. HPLC(Rt =
19.9분; 순도 >88%)로 85.1mg(87%)의 생성물을 수득하였다.
64㎖의 무수 메탄올 (1.25㎎ 펩티드/㎖ MeOH)중에 80mg의 펩티드(4) (0.0753 mmol)를 포함하고 있는 용액
에, 소디움 메톡사이드(1 eq; 메탄올중 나트륨이 5 mg/㎖ 포함되어 있는 용액 346㎕)을 부가하였다. 90분
이 경과한 후 반응이 종결되었고 분석용 HPLC로 반응 진행을 조절하였다. 상기 용액을 건조시킨 후 분리
용 HPLC로 생성물을 정제하였다. 완전히 정제되지 않은 생성물은 단일 피크(Rt = 14.9분; 면적 >80%)를
나타내었다. 분리용 HPLC로 정제한 후 Rt = 14.9분(순도 >94%)인 생성물을 29.6mg 얻었다. FAB-MS에
의해, 목적 생성물에 해당하는 분자 이온 MH = 895 amu이 존재하는 것을 확인하였다.
비교예 1
X1이 Ser(β-D-Gal) 이고, Z1이 Asp 이고, X2가 Trp 이고, X3가 Phe 이고, Z2가 Dap 이고, X4가 Leu{시클로
[Ser1(β-D-Gal)-Asp2-Trp3-Phe4-Dap5-Leu6]시클로(2β-5β)}인 [화학식 1]의 화합물의 제조.
Fmoc-Cys1(β-D-Gal(Ac)4)-OH 대신 Fmoc-Ser1(β-D-Gal(Ac)4)-OH을 사용하고, 시클로[Cys1(β-D-Gal)-Asp2-
Trp3-Phe4-Dap5-Leu6]시클로(2β-5β)화합물의 제조 방법과 동일한 방법에 따라, Boc의 화학적 성질을 이용
하여 고상에서 펩티드를 조합하였다. 이중고리형의 비정제 생성물은 단일 피크를 보였다(Rt = 14.0분; 순
도 >85%). 분리용 HPLC상에서 정제한 후 Rt = 14.0분 이고 순도 > 94%인 생성물을 31mg 얻었다. FAB-MS
분석으로 목적 화합물에 해당하는 분자 이온 MH = 879 amu가 존재하는 것을 확인하였다.
비교예 2
X1이 Asn(β-D-Gal) 이고, Z1이 Asp 이고, X2가 Trp 이고, X3가 Phe 이고, Z2가 Dap 이고, X4가 Leu{시클로
[Asn1(β-D-Gal)-Asp2-Trp3-Phe4-Dap5-Leu6]시클로(2β-5β)}인 [화학식 1]의 화합물의 제조.
Milligen 9010 합성기기를 이용하여, 염기에 불안정한 연결제인 파라-하이드록시메틸벤조산으로 관응기화
된 Microsorb SPR 수지상에서, Fmoc의 화학적 성질을 이용하여 고상으로 펩티드를 조립하였다. 표준적인
보호기 제거 반응 및 커플링 반응 사이클을 이용하였다.
0.6 mmol(3배 정도의 과량)의 (Fmoc-Leu)2 O을 사용하여 DMF중에서 첫 번째 잔기를 에스테르화 하였다.
HOBT/DCC 활성화제와 0.8 mmol의 아미노산을 사용하여, Fmoc-Dap(Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Trp-OH 및
Fmoc-Asp(OtBu)-OH를 커플링시켰다. Asp의 β-카르보닐과 Dap의 β-아미노기 사이의 고리화 반응을 시키
기 전에, TFA/H2O (90:10) 용액을 이용하여 두 개의 아미노산 측쇄의 보호기를 제거하였다. HOBt/DCC (1.6
mmol)을 DMF에 현탁시킨 수지에 부가하여 고리화 반응을 진행하였다. 밤새도록 반응을 시켰다. Asp-아미
노기의 보호기를 제거한 후, PyBop (0.8 mmol) 커플링제와 DIEA (1.2 mmol) 염기를 사용하여 Fmoc-Asn(β
-D-Gal)-OH (0.8 mmol)를 펩티드에 커플링시켰다. 4℃에서 1M NaCl 용액 10㎖를 펩티딜-수지 1g에 부가하
여, 수지로부터 모노사이클릭 펩티드를 분리하였다. 상기 반응을 실온에서 15분간 진행하였다. 상기 용액
을 여과하고 여과물을 10%의 아세트산 수용액이 담겨있는 비이커에 모았다. 수지를 물로 세척하고 아세트
산을 사용하여 여과액의 pH를 7로 조절하였다. pH를 8 내지 8.5로 유지하면서 48mg의 PyBop(1 eq)와 46㎕
의 DIEA (3 eq)를, 93㎖의 DMF(1 mM)에 용해시킨 0.1 mmol의 펩티드(3)에 부가하였다. 이 용액을 밤새 반
응시키고 분석용 HPLC를 이용하여 반응 진행을 결정하였다. 상기 용액을 건조시킨 후 생성물을 분리용
HPLC로 정제하였다. 완전히 정제되지 않은 생성물은 단일 피크(Rt = 13.5분; 순도 >80%)를 보였다. 분리
용 HPLC상에서 정제시킨 후 Rt = 13.5분, 순도 >94%인 생성물을 25mg 얻었다. FAB-MS에 의해 목적 생성물
에 해당하는 분자 이온 MH = 992 amu이 존재하는 것을 알았다.
실시예 2: 시험관에서의 생물학적 활성
타키키닌 및 상관성 펩티드에 의해 발생된 생물학적 반응이 오로지 뉴로키닌 A 수용체(NK-2 수용체)에 의
해서만 결정되는 실험장치를 이용하여, 본 발명의 생성물의 뉴로키닌 A 수용체에 대한 길항제로서의 작용
능력을 평가하였다. 타키키닌에 의해 용량-의존 방식으로 수축되는 수송관을 실험 모델로 사용하였다. 펩
티드의 활성은, 최대 반응의 45%에 해당하는 반응을 하는 β-Ala8 -NKA[4-10] (3nM) 농축액을 효능제
(agonist)로 사용하여 결정하였다. 농도에 따라 효능제의 반응에 대하여, 실시예 1에서 기재된 펩티드의
저해 활성을 평가하고 난용성 MEN-10627과 비교하였다(V. Pavone 등, J. Peptide Science 1, 236). 하기
표는 pA2의 값과 화합물들의 용해도를 보여준다.
화합물 pA2 용해도 (μg/㎖)
실시예 1 8.4 1,800
비교예 1 6.2 2,020
비교예 2 5.8 1,980
MEN 10627 8.1 15
서열 목록
(1) 일반 정보:
6-4
1019980706800
(ⅰ) 출원인:
(A) 성명: 겐트로 인터유니버시타리오 디 리체르카 쉬 펩티디 바이오아티비 유니브. 나폴리
(B) 거리: 비아 메조칸논 4
(C) 도시: 나폴리
(E) 국가: 이탈리아
(F) 우편 번호(ZIP): 80138
(ⅱ) 발명의 명칭: 가용성 타키키닌 길항제, 그 제조 방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
(ⅲ) 서열 수: 1
(ⅳ) 컴퓨터 독출 형태:
(A) 매체 유형: 플로피 디스크
(B) 컴퓨터: IBM PC 호환형
(C) 운영 체계: PC-DOS/MS-DOS
(D) 소프트웨어: PatentIn Release #1.0, 버전 #1.30(EPO)
(2) 서열 번호 1에 대한 정보:
(ⅰ) 서열 특성
(A) 서열의 길이: 6 아미노산
(B) 서열의 종류: 아미노산
(C) 쇄의 수:
(D) 토폴로지: 환형
(ⅱ) 분자 형태: 펩티드
(ⅸ) 서열의 특징
(A) 특징을 나타내는 기호: 교차 연결
(B) 존재 위치: 2..5
(ⅸ) 서열의 특징
(A) 특징을 나타내는 기호: 변형-부위
(B) 존재 위치; 5
(D) 기타의 정보:/생성물 = "Dpr"
(ⅸ) 서열의 특징
(A) 특징을 나타내는 기호; 변형-부위
(B) 존재 위치: 1
(D) 기타의 정보:/ 생성물 = "OTHER"
/주 = "위치 1에 있는 Cys는 Cys(β-D-Gal)"
(ⅹⅰ) 서열의 기재 방법: 서열 번호 1:
Cys Asp Trp Phe Xaa Leu
1 5
(57) 청구의 범위
청구항 1
하기 [화학식 1]의 화합물.
[화학식 1]
시클로[X1
1-Z1
2-X2
3-X3
4-Z2
5-X4
6]시클로(2β-5β)
여기서, X1은 (D 또는 L)Cys(Y) 또는 (D 또는 L)SeCys(Y)이고, Z1은 Asp 이고 Z2는 Dap이거나 또는 Z1은
Dap 이고 Z2은 Asp 이고, X2, X3 및 X4는 천연 또는 합성 소수성 아미노산이며, 상기 Z1, Z2, X2, X3 및 X4
는 동일한 D 또는 L 입체구조를 갖고, Y는 알파 또는 베타 티오아세탈 결합에의해 시스테인에 결합되어
있는 푸라노오스 또는 피라노오스 형태의 알도 및 케토 헥소오스로부터 선택되거나, 또는 티오에테르 결
합에 의해 시스테인에 결합되어 있고 5 내지 10개의 모노머 단위체로 이루어진 시클리톨 또는 폴리비닐
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알콜 또는 PEG로부터 선택되는 글리코시드 그룹임.
청구항 2
제 1항에 있어서, X1은 (D 또는 L)Cys(Y) 또는 (D 또는 L)SeCys(Y)이고, Z1은 Asp 이고 Z2는 Dap 이거나
또는 Z1은 Dap 이고 Z2은 Asp 이고, X2는 Trp 또는 1-Nal이고, X3는 Phe 이고, X4는 Leu 또는 Cha이며, 상
기 Z1, Z2, X2, X3 및 X4가 동일한 D 또는 L 입체구조를 갖고, Y는 제 1항에서 정의한 바와 같은 것을 특징
으로 하는 화합물.
청구항 3
적절한 약물 운반체와 혼합되어 있는 제 1항 또는 제 2항의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 약제
학적 조성물.
청구항 4
관절염, 천식, 염증, 종양 증식, 위장관 운동항진증, 헌팅톤 질환, 신경염, 신경통, 편두통, 고혈압, 요
실금, 두드러기, 카르시노이드 증후군의 증상들, 인플루엔자 및 감기를 치료하기 위한 약제로서 제 1항
또는 제 2항의 화합물을 포함하는 약제.
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